在細(xì)胞傳代、收集與洗滌過程中,臺(tái)式低速離心機(jī)的標(biāo)準(zhǔn)化操作需圍繞設(shè)備準(zhǔn)備、樣品處理、參數(shù)設(shè)置、安全操作及維護(hù)保養(yǎng)五個(gè)核心環(huán)節(jié)展開,以下是具體說明:
一、設(shè)備準(zhǔn)備
檢查設(shè)備狀態(tài):確保離心機(jī)外觀無損壞,電源連接穩(wěn)固,轉(zhuǎn)頭(轉(zhuǎn)子)安裝牢固且無裂縫或腐蝕。檢查離心腔內(nèi)部清潔干燥,無殘留物或異物。
選擇合適的轉(zhuǎn)頭和離心管:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的轉(zhuǎn)頭類型(如甩平式或角式)和離心管規(guī)格(如15mL、50mL)。確保離心管材質(zhì)與樣品化學(xué)性質(zhì)兼容,避免發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
啟動(dòng)冷卻系統(tǒng)(如適用):若離心機(jī)具備冷卻功能,需提前啟動(dòng)并設(shè)定合理溫度(通常為4℃),以保護(hù)對(duì)溫度敏感的生物樣品。
二、樣品處理
樣品混合與平衡:確保樣品充分混合均勻,體積或質(zhì)量基本一致。將樣品管對(duì)稱放置在轉(zhuǎn)頭槽位中,若重量不均需使用平衡塊或其他試管進(jìn)行配平,防止離心機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)因不平衡而損壞設(shè)備或影響分離效果。
樣品量控制:避免樣品量超過離心管或轉(zhuǎn)頭額定容量,防止溢出或損壞設(shè)備。
三、參數(shù)設(shè)置
設(shè)定轉(zhuǎn)速:根據(jù)樣品類型和實(shí)驗(yàn)要求設(shè)定適當(dāng)?shù)碾x心轉(zhuǎn)速。低速離心機(jī)轉(zhuǎn)速范圍通常為1000-5000轉(zhuǎn)/分鐘,細(xì)胞傳代、收集與洗滌常用轉(zhuǎn)速為1000-2000轉(zhuǎn)/分鐘。
設(shè)定離心時(shí)間:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)定離心時(shí)間,常見范圍為幾分鐘至30分鐘。細(xì)胞沉淀通常需要較短時(shí)間(如5-10分鐘),而細(xì)胞洗滌可能需要更長(zhǎng)時(shí)間以確保充分去除雜質(zhì)。
設(shè)定溫度(如適用):對(duì)于需要低溫操作的生物樣品,需設(shè)定合理的離心溫度(如4℃),以防止樣品降解。
四、安全操作
關(guān)閉離心機(jī)門并啟動(dòng):確認(rèn)離心機(jī)門已關(guān)閉牢固,按下啟動(dòng)按鈕開始離心。離心過程中避免打開蓋子或移動(dòng)設(shè)備,防止意外發(fā)生。
觀察運(yùn)行情況:離心過程中注意觀察設(shè)備運(yùn)行是否平穩(wěn),有無異常噪音或振動(dòng)。如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)立即停止離心并檢查原因。
停止離心并取出樣品:離心完成后,待離心機(jī)自動(dòng)停止或轉(zhuǎn)速降至零后打開蓋子取出樣品。取出樣品時(shí)需小心操作,防止損壞樣品或造成人員傷害。
五、維護(hù)保養(yǎng)
清潔離心機(jī)內(nèi)部和轉(zhuǎn)頭:每次使用后立即清潔離心機(jī)內(nèi)部和轉(zhuǎn)頭,使用軟布擦拭避免使用粗糙或濕潤(rùn)的材料。檢查轉(zhuǎn)頭是否有損傷或裂縫等問題,如有異常應(yīng)立即停用并送修。
清潔離心機(jī)外部:使用無腐蝕性的清潔劑和干凈的布擦拭離心機(jī)外部,保持設(shè)備整潔。
定期檢查與保養(yǎng):定期檢查離心機(jī)的機(jī)械部件(如轉(zhuǎn)頭、密封圈等)和電源部分(如插頭、插座等)是否有磨損、斷裂或漏電現(xiàn)象。定期檢查傳動(dòng)帶是否斷裂或老化,及時(shí)更換損壞部件。定期加注機(jī)油和潤(rùn)滑油以保證傳動(dòng)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和耐用性。